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【48812】菌种保藏的办法有哪些 滤纸保藏法和沙土法哪个更好

时间:2024-05-18 来源:医用氧
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  最近小编看到咱们都在评论菌种保藏的办法(菌种保藏的办法有哪些)相关的工作,对此呢小编也是十分的感应爱好,那么这件事究竟是怎样发生的呢?详细又是怎样回事呢?下面便是小编查找到的关于菌种保藏的办法(菌种保藏的办法有哪些)事情的相关信息,咱们咱们一同来看一下吧!

  沙土保藏法取河沙参加10%稀盐酸,加热煮沸30分钟,以去除其间的有机质倒去酸水,用自来水冲刷至中性烘干,用40目筛子过筛,以去掉粗颗粒,备用另取非耕作层的不含腐植质的瘦黄土或红土,加自来水浸泡洗刷数次,直至中性烘干,碾碎,通过100目筛子过筛,以去除粗颗粒,我来为咱们科普一下关于菌种保藏的办法?以下内容期望对你有协助!

  沙土保藏法。取河沙参加10%稀盐酸,加热煮沸30分钟,以去除其间的有机质。倒去酸水,用自来水冲刷至中性。烘干,用40目筛子过筛,以去掉粗颗粒,备用。另取非耕作层的不含腐植质的瘦黄土或红土,加自来水浸泡洗刷数次,直至中性。烘干,碾碎,通过100目筛子过筛,以去除粗颗粒。

  滤纸保藏法。将滤纸剪成0.5×1.2cm的小条,装入0.6×8cm的安瓿管中,每管1-2张,塞以棉塞,1.05 kg/cm,121℃灭菌30分钟。将需求保存的菌种,在合适的斜面培育基上培育,使充沛成长。取灭菌脱脂牛乳1-2ml滴加在灭菌培育皿或试管内,取数环菌苔在牛乳内混匀,制成浓悬液。用灭菌镊子自安瓿管取滤纸条浸入菌悬液内,使其吸饱,再放回至安瓿管中,塞上棉塞。将安瓿管放入内有五氧化二磷作吸水剂的枯燥器中,用真空泵抽气至干。将棉花塞入管内,用火焰按图Ⅶ-13熔封,保存于低温下。需求用菌种,复生培育时,可将安瓿管口在火焰上烧热,滴一滴冷水在烧热的部位,使玻璃决裂,再用镊子敲掉口端的玻璃,待安瓿管敞开后,取出滤纸,放入液体培育基内,置温箱中培育。细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏,前两者可保藏2年左右,有些丝状线年之久。此法较液氮、冷冻枯燥法简洁,不需求特别设备。

  寄主保藏法。寄主保藏法用于尚不能在人工培育基上成长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们有必要在日子的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培育保藏法。病毒等微生物亦可用其他办法如液氮保藏法与冷冻枯燥保藏法进行保藏。冷冻保藏法可分低温冰箱(-20—-30℃,-50—-80℃)、干冰酒精快速冻住(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法,其间最常见的是甘油管冷冻保藏法。

  甘油管保存法。甘油管冷冻保藏法是运用微生物在甘油中成长和代谢遭到按捺的原理到达保藏意图。其办法是将80%的甘油高压蒸汽灭菌待用。将培育好的斜面菌种用无菌水制成高浓度的菌悬液。取1ml灭菌甘油放入与菌液充沛混匀,使甘油浓度约为10%-30%,于-70℃下冻存。-20℃保存时刻较短。或选用体积比为8:2的甘油-生理盐水,参加新鲜培育的菌体肉汤,混合均匀后至-20℃冰箱保存。该办法适用于一般细菌的保存,一起也适用于链球菌、弧菌、真菌等需特别办法保存的菌种,合适运用的规模广,操作简略快捷,效果好,无变异现象发生。甘油-生理盐水保存液保存菌种优于甘油原液,其原因可能是参加生理盐水恰当降低了甘油的高渗效果,且有肉汤培育物适量添加保存液的营养成分,然后更好地维护了待保存的菌株。

  冷冻枯燥保藏法。先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下运用提高现象除掉水分(真空枯燥),其间真空冷冻枯燥法最常见。真空冷冻枯燥保藏法是兼具低温、枯燥、除氧三方面菌种保藏的重要的要素,除不适宜丝状真菌的菌丝体外,对病毒、细菌、放线菌、酵母及丝状菌孢子等各类微生物都适用,不宜用冻干法保存的微生物不到2%。真空冷冻枯燥法是在低温下快速将细胞冻住,然后在真空条件下枯燥,使微生物的成长和酶活动中止。为防止在冷冻和水分提高过程中对细胞的危害,要选用维护剂来制备细胞悬液,使菌在冻住和脱水过程中起到维护效果的溶质,通过氢键和离子键对水和细胞所发生的亲和力来安稳细胞成分的构型。便是使样品中的水分在冰冻状况下,抽真空减压,使冻住的冰直接提高为水蒸气,使样品到达枯燥。枯燥后的微生物在真空下封装,与空气阻隔,到达长时间保藏的意图。

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